외래 DNA를 박테리아로 옮기는 다른 방법은 무엇입니까?

외부 DNA를 숙주 세포 내로 옮기기 위해 다양한 방법이 구현된다. 인간의 간섭으로 자연적으로 또는 인공적으로 발생하는 유전자 전달의 두 가지 범주가 있습니다.

수평 유전자 전이 : 그것은 한 세포에서 다른 세포로 모체를 딸 세포로 옮기는 것으로 정의 할 수 있습니다.

수직 유전자 전이 : 이것에서, 유전자 전이는 모 세포와 딸 세포 사이에 있습니다.

HGT [1]는 형질 전환, 형질 감염 및 컨쥬 게이션을 포함합니다.

변형 : 우리는 그리피스의 실험과 변형 원리에 대해 잘 알고 있습니다. 네이 키드 DNA와 박테리아 시스템에 통합되면 흡수로 정의 할 수 있습니다. 식물, 동물 및 박테리아에서 자연적으로 형질 전환이 관찰됩니다. 전기 천공 법, 탄도 법, 화학적 방법 등과 같은 특정 방법을 인위적으로 구현하여 변형을 수행 할 수 있습니다.

형질 감염 [2] : 변형과 유사합니다. 진핵 세포의 경우, 형질 전환 단어는 암과 관련되어 사용되므로 형질 감염 단어가 채택됩니다. 형질 감염 과정은 유전자 물질을 진핵 생물 시스템으로 전달하기위한 배지로서 바이러스를 포함한다.

컨쥬 게이션 : 박테리아 및 기타 원핵 생물에서 자연적으로 발생하는 과정으로 성적 재생이 용이합니다. 컨쥬 게이션은 공여자 세포 (수컷)가 유전 물질을 수용자 세포 (여성)로 옮길 수있게하는 컨쥬 게이션 브릿지의 형성에 의해 발생한다. 컨쥬 게이션 브릿지는 두 박테리아의 필리 (성 필리)에 의해 형성된다. 참고 : M13과 같은 박테리오파지는이 필리를 사용하여 유전 물질을 박테리아 세포로 직접 옮깁니다.

세포를 형질 전환시키기 위해 유전 공학자와 생명 공학자가 사용하는 형질 전환 방법은 크게 물리적 및 화학적 방법의 두 가지 범주로 분류됩니다.

1) 화학적 방법 :

CaCl2 처리 : CaCl2는 세포막을 불안정하게합니다. 그것은 DNA에 결합하여 인산염의 음전하를 덮을 것입니다. 따라서, DNA는 지질 이중층을 통해 세포에 쉽게 들어갈 수있다. CaCl2는 DNA가 지질 막의 외부 상에 침전되도록한다. 샘플에 열 충격 (42 ° C)을 가하면 변형체의 수율이 증가합니다.

PEG 처리 : 식물 세포의 경우 CaCl2 대신 PEG를 사용합니다. PEG는 4000 Da 분자이며 막을 불안정하게하고 DNA와 복합체를 형성합니다. 그런 다음 DNA는 세포로 쉽게 운반됩니다.

다른 화학적 방법에는 DEAE 덱스 트란, 리포좀, 나노 담체 등이 사용됩니다.

2) 물리적 방법 :

전기 천공 : 막에 임시 공극을 생성하기 위해 전기 펄스를 사용합니다. 작은 플라스미드와 DNA는 화학적 방법을 사용하여 쉽게 통합 할 수 있지만 큰 DNA 분자의 경우 물리적 방법을 사용해야합니다. 그러나 전기 천공의 경우 농도가 높아야합니다. 식물 세포의 경우, 세포는 다당류 및 헤미 셀룰로스, 셀룰로스, 펙틴 등과 같은 다른 생체 분자 층으로 둘러싸여 있습니다. 따라서, 우리는 세포벽을 제거하고 세포를 원형질체. 따라서, 막의 기공이 쉽게 형성 될 수 있고 전기 천공을 통해 DNA가 세포 내로 전달 될 수있다.

http://www.scientzbio.com/s/

생물학적 방법 [4] : 입자 충격 방법, 입자 총 방법 또는 단순히 유전자 총이라고도합니다. 이 장비는 Au, Ag, W 등과 같은 중금속으로 구성된 마이크로 캐리어로 구성됩니다. 건은 또한 파열판, 마이크로 캐리어 (DNA가 장착 된)를 담는 플레이트, 스톱 플레이트 및 마지막으로 셀 고정 플레이트로 구성됩니다 . 건이 발사되면 가스가 건으로 가압되어 파열판이 파손됩니다. 마이크로 캐리어가있는 플레이트 (DNA 포함)는 정지 판쪽으로 이동합니다. 마이크로 캐리어는 이동하여 셀로 들어갔다. 따라서 DNA는 세포로 직접 전달됩니다. 그러나 유전자 총 사용에는 제한이 있습니다. 유전자의 과발현 또는 유전자 침묵을 유발할 수있는 다중 입자의 삽입 및 이의 축적 가능성이있다.

http://www.scientzbio.com/gene-transduction-device/

Microinjections : 그들은 매우 미세한 피펫을 사용하여 DNA 분자를 세포의 핵에 직접 주입하여 변형시킵니다. 식물 및 동물 세포에 사용됩니다.

참고 : 데이터와 관련이없는 경우 수정 및 제안에 감사드립니다.

참조 및 추가 자료

Brown, TA, 2016. 유전자 클로닝 및 DNA 분석 : 소개. 존 와일리 & 아들

Wolff, JA, Malone, RW, Williams, P., Chong, W., Acsadi, G., Jani, A. and Felgner, PL, 1990. 생체 내에서 마우스 근육으로 유전자를 직접 전달합니다. 과학, 247 (4949 Pt 1), pp.1465-1468.

Lorenz, MG and Wackernagel, W., 1994. 환경에서의 자연 유전자 변형에 의한 박테리아 유전자 전이. 미생물 학적 검토, 58 (3), pp.563-602.

Lurquin, PF, 1997. electroporati에 의한 유전자 전달